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手動生化

服務詳情

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DPPH自由基清除率(檢測服務)

自由基清除率檢測試劑盒(比色法)又稱氮自由基清除能力檢測試劑盒或氮自由基清除率檢測試劑盒,其檢測原理是DPPH自由基是一種較穩(wěn)定的含氮自由基,含一個單電子,溶于乙醇后溶液呈紫色,在517nm下有強吸收,如果有其他物質提供一個電子與此單電子配對,溶液會褪色,褪色程度與接受電子的量呈正比,通過吸光度下降的程度來反應樣品的氮自由基清除能力,主要用于檢測血清、植物組織、抗氧化類食品、保健品及藥品等樣本。

價格:¥15.00

規(guī)格:反應

貨號:ST1505

品牌:LEAGENE

 服務介紹:

      自由基清除率檢測試劑盒(比色法)又稱氮自由基清除能力檢測試劑盒或氮自由基清除率檢測試劑盒,其檢測原理是DPPH自由基是一種較穩(wěn)定的含氮自由基,含一個單電子,溶于乙醇后溶液呈紫色,在517nm下有強吸收,如果有其他物質提供一個電子與此單電子配對,溶液會褪色,褪色程度與接受電子的量呈正比,通過吸光度下降的程度來反應樣品的氮自由基清除能力,主要用于檢測血清、植物組織、抗氧化類食品、保健品及藥品等樣本。

貨號

名稱

規(guī)格

價格

ST1505

DPPH自由基清除率檢測試劑盒

反應

15

 實驗流程:

1、準備樣品:

植物樣品:取新鮮植物樣本,清洗干凈,研缽研碎(粉碎),干燥箱烘干后過篩,稱取0.05g樣品,加入0.8ml氮自由基提取液,40℃水浴浸提30~60min,10000rpm離心10min,上清液待用,4℃保存?zhèn)溆?亦可參考相關資料提取方法提取)。

血漿、血清和尿液樣品:血漿(用肝素或枸櫞酸鈉抗凝,不宜使用EDTA抗凝) 4℃ 5000rpm離心10min,取上清液待用;血清或尿液樣品可直接測定。

細胞樣品:按每5×106個細胞加入0.8ml氮自由基提取液,超聲破碎(功率200W,超聲3s,間隔10s,重復30次),10000rpm離心10min,取上清液待用。

④果汁、葡萄酒等樣品:按樣品:氮自由基提取液=1:9的比例震蕩混勻,10000rpm離心10min,上清液待用,4℃保存?zhèn)溆谩?/span>

    高活性樣品:如果樣品中有效濃度較高,可用提取液進行恰當?shù)南♂尅?/span>

   2、配制維生素C溶液:將一支10mg維生素C充分溶解于1ml氮自由基提取液中

   3、配制Vc標準工作液:如需測線性關系,建議用氮自由基提取液10mg/ml維生素C溶液稀釋至20、15、10、8、6、4、2μg/ml的Vc標準工作液

    4、 分光光度計開機預熱30min,調節(jié)波長517nm(500~530nm亦可),無水乙醇調零。

    5、DPPH加樣:按照下表設置空白管、樣本測定管、樣本對照管、陽性對照管,溶液應按照順序依次加入,混勻,室溫避光靜置30min。

加入物(ml)

空白管

樣本測定管

樣本對照管

陽性對照管(標準管)

氮自由基提取液

0.2

--

--

--

上清液

--

0.2

0.2

--

Vc標準工作液

--

--

--

0.2

無水乙醇

0.9

0.9

1.8

0.9

DPPH溶液

0.9

0.9

--

0.9

6、 OD測定:將各管溶液依次加入到比色皿中,用分光光度計檢測各管吸光度值,依次記為A0、A1、A2、A3。

實驗結果:

全自動生化儀檢測后導出結果,結果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣運輸要求:

1、動植物組織樣本(干冰運輸)

準確稱取動物組織重量按重量(mg):體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水),冰水浴條件下,機械勻漿,制備成10%的勻漿液,2500~3000轉/分鐘,離心10分鐘,取上清液進行測定。

2、血清樣本(干冰運輸)

全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜(GLU檢測請勿全血樣本放置過夜取血清)后于2-8℃ 3000轉/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心,然后檢測。

3、血漿樣本(干冰運輸)

可用肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2-8℃3000轉/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心,然后檢測。

4、細胞樣本

貼壁細胞:將細胞用PBS沖洗2次后,用細胞刮將細胞小心刮下來,將培養(yǎng)液3000轉/分,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。

懸浮細胞:將培養(yǎng)液3000轉/分,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。

細胞上清:標本于2-8℃,3000轉/分離心15min取上清,上清立即用于實驗,或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復凍融。

僅供科研用途,不可用于臨床診斷!