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手動生化

服務詳情

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植物過氧化物酶(POD)(檢測服務)

植物過氧化物酶(POD)檢測試劑盒(愈創(chuàng)木酚微板法)檢測原理是以愈創(chuàng)木酚(又稱2-甲氧基酚)作為底物,在酶促反應的最適條件下采用每隔一定時間測定產(chǎn)物生成量的方法,于酶標儀470nm處測定吸光度,以吸光度變化所需酶量進行計算,主要用于植物組織的裂解液或勻漿液、血清等樣品中內(nèi)源性的過氧化物酶活性,尤其適用于測定水果中過氧化物酶活性。

價格:¥15.00

規(guī)格:反應

貨號:ST1480

品牌:LEAGENE

服務介紹:

      植物過氧化物酶(POD)檢測試劑盒(愈創(chuàng)木酚微板法)檢測原理是以愈創(chuàng)木酚(又稱2-甲氧基酚)作為底物,在酶促反應的最適條件下采用每隔一定時間測定產(chǎn)物生成量的方法,于酶標儀470nm處測定吸光度,以吸光度變化所需酶量進行計算,主要用于植物組織的裂解液或勻漿液、血清等樣品中內(nèi)源性的過氧化物酶活性,尤其適用于測定水果中過氧化物酶活性。

貨號

名稱

規(guī)格

價格

ST1480

植物過氧化物酶(POD)檢測試劑盒

反應

15

實驗流程:

1、 準備樣品:

植物樣品:取0.5-1.0g植物組織或水果中層果肉加入4ml預冷的POD Lysis Buffer研磨或勻漿,4℃ 10000g離心15~20min,留取上清液,即為POD粗提液

血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于該試劑盒的測定,-20℃凍存,用于過氧化物酶的測定。

細胞或組織樣品:取恰當細胞或組織裂解液,如有必要用POD Lysis Buffer進行適當勻漿,4℃ 10000g離心15~20min,留取上清液,即為POD粗提液,

高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的過氧化物酶,可以使用POD Lysis Buffer進行恰當?shù)南♂尅?/span>

2、 配制POD Assay Buffer工作液:取適量的POD氧化劑和POD Assay Buffer,按POD氧化劑:POD Assay Buffer=1:14混合,

3、 POD加樣:取96孔板,按照下表設置對照孔孔、測定孔,注意:對照孔、測定孔中為同一待測樣品,但對照孔中是提前加熱煮沸5min的樣品

加入物(μl)

對照孔

測定孔

待測樣品

5(提前煮沸5min)

5

POD Lysis Buffer

145

145

POD Assay Buffer工作液

100

100

 4、 POD測定:立即以酶標儀,以對照孔為對照,測定470nm處測定孔的吸光度(A測定0);37℃準確孵育3min后,立即加入5μl POD終止液終止反應(備選方案),以對照孔為對照,以酶標儀測定470nm處測定孔的吸光度(A測定1)。

實驗結(jié)果:

全自動生化儀檢測后導出結(jié)果,結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣運輸要求:

1、動植物組織樣本(干冰運輸)

準確稱取動物組織重量按重量(mg):體積(ul)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(推薦0.86%或0.9%的生理鹽水),冰水浴條件下,機械勻漿,制備成10%的勻漿液,2500~3000轉(zhuǎn)/分鐘,離心10分鐘,取上清液進行測定。

2、血清樣本(干冰運輸)

全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜(GLU檢測請勿全血樣本放置過夜取血清)后于2-8℃ 3000轉(zhuǎn)/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心,然后檢測。

3、血漿樣本(干冰運輸)

可用肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃3000轉(zhuǎn)/分離心15min,取上清即可立即檢測;或進行分裝,并將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。解凍后的樣本應再次離心,然后檢測。

4、細胞樣本

貼壁細胞:將細胞用PBS沖洗2次后,用細胞刮將細胞小心刮下來,將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。

懸浮細胞:將培養(yǎng)液3000轉(zhuǎn)/分,離心10min。棄上清留細胞沉淀,干冰運輸。

細胞上清:標本于2-8℃,3000轉(zhuǎn)/分離心15min取上清,上清立即用于實驗,或分裝后于-20℃或-80℃保存。避免反復凍融。

僅供科研用途,不可用于臨床診斷!